Kit ta' Estrazzjoni jew Purifikazzjoni ta' Aċidu Nuklejku
Nukleiku Acid Extrazzjoni Or Purifikazzjoni Kitjew maħżuna f'-20℃. Il-kampjun għandu jiġi ttrasportat bl-użu ta 'ħdejjed ta' 0℃.
Introduction
Il-Kit ta 'Estrazzjoni jew Purifikazzjoni ta' Aċidu Nuklejku (Metodu Żibeġ Manjetiċi) huwa ddisinjat għall-purifikazzjoni awtomatizzata ta 'RNA u DNA minn fluwidi tal-ġisem (bħal swabs, plażma, serum) bl-użu ta' strumenti awtomatizzati ta 'estrazzjoni ta' aċidu nuklejku. It-teknoloġija tal-partiċelli manjetiċi tipprovdi DNA/RNA ta 'kwalità għolja li hija adattata għal użu dirett f'applikazzjonijiet downstream bħal amplifikazzjoni jew reazzjonijiet enżimatiċi oħra.
Application Range
Id-demm sħiħ, il-plażma, is-serum u kampjuni tat-tessuti oħra ġew lisati u diġeriti direttament. L-aċidu nuklejku rilaxxat ġie adsorbit b'mod selettiv minn żibeġ manjetiċi tan-nanometru super paramanjetiku. Imbagħad il-proteina, il-jonji tal-melħ inorganiku u l-impuritajiet organiċi tneħħew permezz ta 'soluzzjoni tal-ħasil. Fl-aħħarnett, l-aċidu nuklejku ġie eluwit b'eluwent biex tinkiseb soluzzjoni ta' aċidu nuklejku pur.
Kit Contents
Cat. Nru. | YXN-VIRAL01-32A-BR | Komponenti | ||
-50A | - 100A | |||
Daqs | 32Tes | 50Test | 100Test | |
Liżi Buffer | 96 sew Ippakkjar minn qabel ed Pjanċi 2 biċċiet | 25ml | 50ml | Surfactant u Tris |
Wash Buffer I | ★15ml | ★30ml | Soluzzjoni b'ħafna melħ | |
Wash Buffer Il | ★6ml*2 | ★12ml * 2 | Soluzzjoni ta 'melħ baxx | |
Buffer tal-Eluzzjoni | 10ml | 20ml | Soluzzjoni ta 'melħ baxx | |
Reaġent MagaBio | 1.0ml | 2.0ml | Partiċelli manjetiċi | |
Manwal(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Nnoti:GħalYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,żid 15mL etanol assolut ma ★15mL Wash Buffer I qabel l-użu; żid 24mL etanol assolut ma ★6mL Aħsel buffer Il qabel l-użu. | ||||
GħalYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, żid 30mL etanol assolut ma ★30mL Wash Buffer I qabel l-użu; żid 48mL etanol assolut ma ★12mL Aħsel buffer Il qabel l-użu.【Reaġenti li għandhom jiġu ppreparati mill-utent】Jekk jogħġbok ipprepara l-etanol assolut (grad analitiku) minnek innifsek. |
Storage Conditions
Mal-wasla tal-kit, il-komponenti tal-kit jistgħu jinħażnu f'temperatura tal-kamra (15 - 25°C). Ir-reaġenti huma stabbli sa sena mid-data tal-manifattura.
Sample Requirements
1. Kampjun applikabbli: Tampuni, plażma, serum u demm sħiħ eċċ.
2. Ħażna u trasport tal-kampjun: Il-kampjun għandu jiġi ttestjat immedjatament
Materials u Devices Required but Not Provided
1. Ingwanti li jintremew mingħajr trab
2. Kontenitur ta 'periklu bijoloġiku
3. Lapes jew per
Procedure
Dan li ġej juża lotion tat-tampuni tal-estrazzjoni tal-istrixxi tal-kampjun bħala eżempju biex jispjega fil-qosor il-passi tal-operat tar-reaġent tal-estrazzjoni fuq l-istrument tal-estrazzjoni tal-aċidu nuklejku bijoloġikuBioer NPA-32PjewSMART 32. Għal tipi oħra ta 'kampjuni, jekk jogħġbok irreferi għall-manwal tal-utent. Jista 'jitħaddem ukoll mill-klijenti skont akkwist sperimentali:
1. Reaġent Preparazzjoni
a. GħalYXN-VB03-32A-50A u YXN-VB03-32A-100A
Żid 500uL Lysis Buffer mal-kolonna 1 u 7 tal-pjanċa 2.2mL 96-deep-well, 500uL Wash Buffer I mal-kolonna 2 u 8, 500uL Wash Buffer II mal-kolonna 3, 4 u 9,10; 70uL Elution Buffer għall-kolonna 5 u 11, 180uL ilma pur u 20uL MagaBio Reagent għall-kolonna 6 u 12 (iż-żibeġ manjetiċi għandhom jitħalltu sewwa qabel l-użu),
b. GħalYXN-VB03-32A
Poġġi s-96 reaġenti ippakkjati sew f'temperatura tal-kamra. Ħawwad pjanċa 96-bir rasu 'l isfel għal tliet darbiet, u aqla' l-borża tal-plastik. Iċċentrifuga r-reaġent ippakkjat minn qabel għal ftit sekondi (jew tbandal bl-idejn għal ftit drabi) biex tevita li r-reaġent jeħel mal-ħajt tat-tubi. Qargħ il-film tal-fojl tal-aluminju tal-pjanċa b'96 bir u identifika d-direzzjoni tal-pjanċa (żibeġ manjetiċi fil-kolonna #6 u #12),
2.Kampjun Estrazzjoni
1. Żid kampjun ta '300uL mal-kolonni tal-pjanċa ta' 96 bir #1 u #7, jekk jogħġbok evita l-kontaminazzjoni inkroċjata,
2. Poġġi 96 pjanċa ta 'bir fil-fond mal-istrument, installa t-truf ta' 8 strixxi fuq l-istrument,
3. Mexxi l-programm skond il-proċeduri li ġejjin,
4. Wara li tispiċċa l-purifikazzjoni awtomatika, ittrasferixxi l-Elution Buffer fil-kolonni 5 u 11 għal tubu ċentrifugu antinukleari nadif ta '0.5mL; jekk ma tużahx immedjatament, jekk jogħġbok aħżen f'-20 °C.
Performance Characteristics
1. Il-prodott estratt jiġi skopert minn reaġent ta 'skoperta tad-DNA HBV ta' sensittività għolja biex jilħaq sensittività ta '10 IU/mL. Il-prodott estratt jiġi skopert minn reaġent ta 'skoperta HCV RNA ta' sensittività għolja biex jilħaq sensittività ta '50 IU/mL.
2. Agħżel 4 kampjuni (kampjun tas-serum/plażma, kampjun tat-tampuni nażofarinġali, kampjun taċ-ċelluli ċervikali mqaxxra), kull kampjun jiġi dilwit 10 darbiet bi 3 gradjenti (inkluż it-total tal-kampjun oriġinali ta '4 konċentrazzjonijiet), bl-użu ta' reaġenti kwalifikati u aġenti tat-testijiet biex jinstabu interni ġene ta 'referenza skont l-istruzzjonijiet tal-prodott, u l-valur Ct ta' kull lott ivarja b'inqas minn 1.
Step | Ukoll Post | Programma Isem | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(mfi:SS) | Magnet Time(min:SS) | Aassorbiment | Speed | Volume tatus (μL) | Ttemperatura |
1 | 1 | Lysis | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wirmied1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wirmied2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wirmied3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Elużjoni | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | Armi | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. ĠENERAL SIGURTÀ.
L-użu ta' dan il-prodott b'mod mhux speċifikat fid-dokumentazzjoni tal-utent jista' jirriżulta fi korriment personali jew ħsara lill-istrument jew l-apparat. Kun żgur li kull min juża dan il-prodott ikun irċieva struzzjonijiet fil-prattiki ġenerali tas-sigurtà għal-laboratorji u l-informazzjoni dwar is-sigurtà pprovduta f'dan id-dokument.
1.1 Qabel ma tuża strument jew apparat, aqra u tifhem l-informazzjoni dwar is-sigurtà pprovduta fid-dokumentazzjoni tal-utent ipprovduta mill-manifattur tal-istrument jew tal-apparat.
1.2 Qabel ma timmaniġġja s-sustanzi kimiċi, aqra u tifhem l-Iskedi ta' Data tas-Sigurtà (SDSs) applikabbli kollha u uża tagħmir protettiv personali xieraq (ingwanti, ġagagi, protezzjoni għall-għajnejn, eċċ.). Biex tikseb SDSs, ara t-taqsima "Dokumentazzjoni u Appoġġ" f'dan id-dokument.
2. Kimika sigurtà
TQANDIL KIMIKU ĠENERALI. Biex timminimizza l-perikli, kun żgur li l-persunal tal-laboratorju jaqra u jipprattika l-linji gwida ġenerali tas-sigurtà għall-użu, il-ħażna u l-iskart tal-kimika pprovduti hawn taħt, u ikkonsulta l-SDS rilevanti għal prekawzjonijiet u struzzjonijiet speċifiċi: Aqra u tifhem il-Folji tad-Dejta tas-Sigurtà (SDSs) ipprovduti mill-kimika. manifattur qabel ma taħżen, timmaniġġja jew taħdem bi kwalunkwe kimika jew materjal perikoluż.
2.1 Minimizza l-kuntatt ma 'kimiċi. Ilbes tagħmir protettiv personali xieraq meta timmaniġġja kimiċi (per eżempju, nuċċalijiet tas-sigurtà, ingwanti, jew ilbies protettiv).
2.2 Minimizza l-inalazzjoni ta 'kimiċi. Tħallix kontenituri kimiċi miftuħa. Uża biss b'ventilazzjoni adegwata (per eżempju, fume hood).
2.3 Iċċekkja regolarment għal tnixxijiet jew tixrid kimiċi. Jekk iseħħ tnixxija jew tixrid, segwi l-proċeduri ta' tindif tal-manifattur kif rakkomandat fl-SDS.
2.4 Immaniġġja l-iskart kimiku f'kappa tad-dħaħen.
2.5 Tiżgura l-użu ta’ kontenituri tal-iskart primarju u sekondarju. (Skart primarju
kontenitur iżomm l-iskart immedjat. Kontenitur sekondarju fih tixrid jew tnixxija mill-kontenitur primarju. Iż-żewġ kontenituri għandhom ikunu kompatibbli mal-materjal tal-iskart u jissodisfaw ir-rekwiżiti federali, statali u lokali għall-ħażna tal-kontenituri.).
2.6 Wara li tbattal kontenitur tal-iskart, issiġillah bit-tapp ipprovdut.
2.7 Ikkaratterizza (b'analiżi jekk meħtieġ) l-iskart iġġenerat mill-applikazzjonijiet partikolari, reaġenti, u substrati użati fil-laboratorju tiegħek.
2.8 Żgura li l-iskart jinħażen, jiġi trasferit, ittrasportat u mormi skont ir-regolamenti lokali, statali/provinċjali u/jew nazzjonali kollha.
2.9 Materjali radjuattivi jew bijoperikolużi jistgħu jeħtieġu tqandil speċjali, u jistgħu japplikaw limitazzjonijiet tar-rimi.
3.Bijoloġiċi periklu sigurtà
Periklu Bijopotenzjali. Skont il-kampjuni użati fuq dan l-istrument, il-wiċċ jista 'jitqies bħala periklu bijoloġiku. Uża metodi xierqa ta' dekontaminazzjoni meta taħdem ma' perikli bijoloġiċi.
PERIKLU BIJOJJU. Kampjuni bijoloġiċi bħal tessuti, fluwidi tal-ġisem, aġenti infettivi, u demm tal-bnedmin u annimali oħra għandhom il-potenzjal li jittrasmettu mard infettiv. Segwi r-regolamenti lokali, statali/provinċjali u/jew nazzjonali applikabbli kollha. Ilbes tagħmir protettiv xieraq, li jinkludi iżda mhux limitat għal: nuċċalijiet protettivi, lqugħ tal-wiċċ, ilbies/kowt tal-laboratorju, u ingwanti. Ix-xogħol kollu għandu jitwettaq f'faċilitajiet mgħammra kif suppost bl-użu tat-tagħmir tas-sigurtà xieraq (per eżempju, apparat fiżiku ta 'konteniment). L-individwi għandhom jiġu mħarrġa skont ir-rekwiżiti regolatorji applikabbli u tal-kumpanija/istituzzjoni qabel jaħdmu b'materjali potenzjalment infettivi.
Aqra u segwi l-linji gwida applikabbli u/jew ir-rekwiżiti regolatorji f'dan li ġej:
Fl-Istati Uniti: Il-linji gwida tad-Dipartiment tas-Saħħa u s-Servizzi Umani tal-Istati Uniti ppubblikati f'Bijosigurtà fil-Laboratorji Mikrobijoloġiċi u Bijomediċi misjuba fuq: www.cdc.gov/biosafety.
Standards tas-Sigurtà u s-Saħħa tax-Xogħol, Patoġeni li jinġarru mid-demm (29 CFR§1910.1030), misjuba fuq:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
Il-protokolli tal-Programm tal-Bijosigurtà tal-kumpanija/istituzzjoni tiegħek biex jaħdmu ma'/immaniġġjaw materjali potenzjalment infettivi. Informazzjoni addizzjonali dwar il-linji gwida dwar il-periklu bijoloġiku hija disponibbli fuq: www.cdc.gov.
Fl-UE: Iċċekkja l-linji gwida lokali u l-leġiżlazzjoni dwar il-prekawzjoni dwar il-periklu bijoloġiku u l-bijosikurezza u irreferi għall-aħjar prattiki ppubblikati fil-Manwal tal-Bijosigurtà tal-Laboratorju tal-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa (WHO), it-tielet edizzjoni, li jinsab fuq: www.who.int/csr/resources/publications /biosafety/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/mt/.